摘要： 目的 检测应用脐血诱导成熟树突状细胞(DC),并以急性白血病(AL)总RNA冲击该DC所诱导产生的特异性细胞毒T细胞(CTL)的杀伤活性.方法 取AL患者外周血或骨髓,以淋巴细胞分离液获得单个核细胞(MNC),并提取RNA.分离脐血MNC,以2×106 个细胞/孔接种于12孔培养板,培养体系中加入重组人粒单核细胞集落刺激因子(rhGM-CSF),重组人白细胞介素4(rhIL-4)和肿瘤坏死因子α(TNF-α),并在培养第5天,加入白血病总RNA,致敏脐血DC.培养过程中,观察树突状细胞形态,流式细胞仪检测表型.培养第12天收获成熟DC,与自体T淋巴细胞共培养,诱导产生白血病特异性CTL,乳酸脱氢酶法(LDH法)测定溶细胞活性.结果 脐血来源DC表现出成熟DC典型形态和免疫表型特征,培养第5天,DC相关分化抗原CD1a、CD83、CD86、CD80的表达较培养前增高,差异有统计学意义(P＜0.01);培养至第12天,DC相关分化抗原CD1a、CD83、CD86、CD80的表达较培养第5天增高,另外人类白细胞相关抗原(HLA-DR)的表达也较培养第5天增高,差异均具有统计学意义(P＜0.01).以白血病RNA转染的DC组所刺激的自体T淋巴细胞对自身白血病靶细胞显示出明显的杀伤活性,而未经抗原转染DC组无明显杀伤活性,按照各效靶比进行两者的比较,差异有统计学意义(P＜0.01). 结论利用细胞因子体外诱导脐带血产生大量成熟DC,以急性白血病RNA转染此DC,并以此白血病特异性DC诱导产生抗白血病特异性CTL,不失为清除AL患者体内残留灶的积极措施.
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