临床荟萃 ›› 2009, Vol. 24 ›› Issue (15): 1309-1312.
申建刚;安君艳;桑荣霞;魏娟;霍晓霞;张晓岚
SHEN Jian-gang;AN Jun-yan;SANG Rong-xia;WEI Juan;HUO Xiao-xia;ZHANG Xiao-lan
摘要: 目的 应用黏着斑激酶相关非激酶(FRNK)表达质粒瞬时转染纤维连接蛋白(FN)刺激的肝星状细胞(HSC),探讨膜型基质金属蛋白酶1(MT1-MMP)在FRNK诱导HSC凋亡中的作用.方法 在体外,以FN刺激HSC增殖,采用脂质体介导的方法用FRNK表达质粒瞬时转染HSC,应用膜联蛋白/碘化丙啶双标记流式细胞术和透射电镜技术检测细胞的凋亡,蛋白免疫印迹及RT-PCR方法检测FRNK、FAK、p-FAK(Tyr397)、MT1-MMP蛋白及其mRNA表达.结果 FRNK表达质粒成功转染HSC,在翻译后水平抑制FAK磷酸化.与空质粒组比较,FRNK表达质粒转染HSC 48小时后,HSC凋亡率由(9.28±1.05)%增加至(25.37±1.92)0A(P<0.01).FRNK抑制FAK磷酸化后在翻译和转录水平上调MT1-MMP表达,2.26±0.14 vs 1.09±0.15(P<0.01);1.58±0.18 vs1.00±0.10(P<0.01).结论 在脂质体介导下瞬时转粢FRNK表达质粒可诱导HSC发生凋亡,上调MT1-MMP可能是其机制之一.
中图分类号: